W XII 1917 w gimnazjum powstała drużyna im. Królowej Jadwigi (Kamila Wiśniowiecka-Kopcińska) - jedna z ośmiu na Lubelszczyźnie, następna w 1919  II DH im. Zawiszy Czarnego, zamienionego później na E. Drużbacką (seminarium), kolejne - III DH im. M. Konopnickiej (Szkoła Przemysłowa, 1922) i IV DH im. E. Plater - od 1934 im. M. Mościckiej (Szkoła Handlowa). W 1924 na czele trzech drużyn stały W. Olszewska, G. Bełzówna i K. Wolańska. W l. 30. powstały jeszcze 3 drużyny w szkołach podstawowych. W 1939 w mieście było 7 drużyn.
Harcerki zajmowały się hafciarstwem i guzikarstwem, pomocą bezrobotnym, uczestniczyły w kursach łączności (1934/35 - 12 harcerek. 6 zamojskich harcerek uczestniczyło w I Zlocie Narodowym. 15 X 1928 powstał hufiec harcerek (kmdt Janina Sicińska, później Julia Kabas 1929-31, ponownie Sicińska 1931-33). W 1932 powstały osobne hufce - miasta i powiatu, w 1934 jednak połączone, z 14 drużyn - było 6 miejskich. W 1933 komendantką hufca powiat., a 1934-49 hufca zamojskiego była Jadwiga Stojakówna (Harczuk-Muszyńska - osobne hasło), harcerka od 1923, odznaczona Srebrnym Krzyżem Zasługi dla ZHP z "Rozetą-Mieczami".
W 1935 na zlocie w Spale uczestniczyły 32 harcerki z zamojskiego Hufca. W 1936 oba hufce wydały jednodniówkę "Zamość w mundurze harcerskim". W 1938 utworzono Pogotowie Harcerek (szkolenia sanitarne, łącznościowe itp). które w w 1939 niosło pomoc rannym, później wysiedlonym z Wielkopolski, przygotowało paczki dla więźniów, uczyło dzieci.
Do wyróżniających się należały m.in. Katarzyna Wajlandówna, Gierka Bełzówna, Anna Giec-Malinowska, Eugenia Kawalec, Romualda Abraszewska. W czasie wojny harcerki z poświęceniem pracowały jako sanitariuszki, czynnie uczestniczyły w konspiracji. Na Rotundzie zginęły: Grażyna Kierszniewska (osobne hasło), Danuta Sztarejko (zm. 1940) i Halina Białówna (zm. 1944).
Po wojnie w Gimnazjum im. M. Konopnickiej działała I DH im. Królowej Jadwigi (dh. Jadwiga Prus), od 1949 "Rzeka" (druż. Krystyna Łenyk, następnie Janina Michalec). Kolejne, II DH w szkołach handlowych (później "Słońce"), III DH w gimnazjum krawieckim (dh Irena Żochowska), IV DH im. Olgi Małkowskiej w szkole nr 1 (dh Halina Mikulska).
W V 1947 na jednym z ognisk goszczono bpa Wyszyńskiego. 23 V 1948 podczas "Harcerskiej Niedzieli" na stadionie hufiec żeński otrzymał nowy sztandar, ratusz zdobiła lilijka harcerska, latem wyjechało na obóz pod Słupsk 90 harcerek.
Harcerstwo przestało istnieć 15 VI 1949. Harcerki zamojskie z 1918-1949 od 10 XI 1991 spotkają się corocznie. W 1993 gdy najwyższym odznaczeniem uhonorowano J. Muszyńską - 9 wychowanek tytułem Instruktora-Seniora ZHP. W 1997 Krzyżami harcerskimi udekorowano groby Białłównej, Gomółki i Fenca.